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歡 “洗” 實(shí)驗室
日期:2025/06/04 05:11 瀏覽:7809
現代生物技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細胞培養有著(zhù)密切的關(guān)系,特別是在醫藥領(lǐng)域的發(fā)展,細胞培養更是具有更為重要的價(jià)值。
比如基因工程藥物或疫苗的研究生產(chǎn)大都是通過(guò)細胞培養來(lái)實(shí)現的,即使是科技飛速發(fā)展的今天,細胞工程、基因工程也離不開(kāi)細胞的培養。細胞培養在整個(gè)生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)中仍處于核心地位
在細胞培養實(shí)驗中,主要有3類(lèi)常見(jiàn)的培養用器皿,包括:培養器皿(培養瓶,培養皿等)、培養操作有關(guān)的器皿(貯液瓶、吸管等)、其他用品(離心管、燒杯、量筒等)
培養皿的分類(lèi)
根據材質(zhì)分類(lèi),可將培養皿分為玻璃培養皿與塑料培養皿,玻璃培養皿經(jīng)過(guò)清洗高溫滅菌后可反復使用,而塑料培養皿為一次性使用,多用于致病菌的培養。由于玻璃培養皿的可再利用的屬性,玻璃培養皿仍處于主導地位。
培養皿的清洗方式
一般的清洗包括浸泡、刷洗、浸酸、沖洗和滅菌五個(gè)步驟。清洗后的玻璃器皿不僅要求視覺(jué)上看起來(lái)干凈,而且不能在培養表面殘留任何物質(zhì)。
01
浸泡
初次使用和培養使用后的培養皿,均需用清水浸泡,以使附著(zhù)物軟化或被溶液掉。
培養過(guò)細胞后的器皿,則常附有大量蛋白質(zhì)和殘存的細胞、碎片等,干后不易洗掉,故用后要完全浸入水中,避免留有氣泡或浮在液面上。
02
刷洗
浸泡后的器皿,一般要用軟毛刷配合洗滌劑刷洗,以除去器皿表面附著(zhù)較牢的雜質(zhì)。工具不要太硬,刷洗要適度,過(guò)度會(huì )損害器皿表面光澤度,表面出現劃痕后,會(huì )影響細胞貼壁生長(cháng),同時(shí)更容易破損。
03
浸酸
酸液是由重鉻酸鉀、濃硫酸和蒸餾水按一定比例配制而成,酸液對器皿腐蝕作用輕微,但是長(cháng)時(shí)間浸泡的細胞瓶會(huì )變脆,而其強氧化作用可除掉刷洗不掉的微量雜質(zhì)。
浸酸是清洗過(guò)程中關(guān)鍵的一環(huán)。在接觸酸液之前必須做好防護,準備過(guò)肘的耐酸手套、相關(guān)面部和身體的防護器具及工作服等。
04
沖 洗
在浸酸后,將器皿撈出,盡可能瀝干容器內的酸液,避免迸濺。先用自來(lái)水沖洗3-5次,然后用蒸餾水沖洗3-5次,最后用去離子水沖洗3-5次,以保證器皿內無(wú)酸液殘留,晾干或烘干備用。有條件的實(shí)驗室可使用超純水再次沖洗。
雖然器皿中殘留的酸液很少,但是對沖洗后的廢水處理,仍然要格外注意,如果量少可以存至廢液桶統一處理,如果量大要根據實(shí)際情況判定,能否直接將廢液排入下水道。
05
滅 菌
為了避免有水蒸氣進(jìn)入培養器皿中,一般選擇干熱方式滅菌。將已烘干的培養瓶/皿和移液管進(jìn)行封口處理,使用雙層錫紙等材料包裹瓶口,移液管尾以脫脂棉填充后,過(guò)酒精燈快速灼燒。包裝封口過(guò)程中,避免使用紗布等易產(chǎn)生碎屑和纖維的材料,防止落入耗材中影響細胞培養,也避免使用膠帶等不耐高溫的材料,防止融化后不宜清理或導致起火。
待干熱滅菌箱降到室溫后,將處理好的培養耗材小心帶至細胞房中照射紫外,進(jìn)行表面消毒即可使用,記得在開(kāi)封后使用無(wú)菌PBS進(jìn)行潤洗。
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